Holmes, als dessen Geburtsort z. T. auch das niederschlesische Schweidnitz genannt wird,[1] gab sein Filmdebüt 1909 in The Way Of The Cross unter der Regie von James Stuart Blackton. Zwei Jahre später zog er nach Los Angeles und war 1914 in Life's Shop Window, dem ersten Spielfilm der Fox Film Corporation, zu sehen. In der Folgezeit entwickelte er sich zum gefragten Spezialisten für Filmbösewichte. Für die Rolle in Josef von Sternbergs Regiedebüt Die Heilsjäger (1925) erhielt der dunkelhaarige Mime eine Gage von 100 US-Dollar für einen Tag am Dreh.
Stuart Holmes war mit Blanche Maynard (1892–1965) verheiratet.[2][3] Neben seiner schauspielerischen Tätigkeit trat er auch als Bildhauer und Maler in Erscheinung.[1]
Holmes starb Ende 1971 im Alter von 87 Jahren und wurde neben seiner Frau auf dem Saint Francis Cemetery in Phoenix beigesetzt.[3]