Mrs. Puff ialah watak fiksyen dalam siri animasi televisyen Amerika, SpongeBob SquarePants. Watak ini disuarai oleh Mary Jo Catlett. Kemunculan pertamanya ialah pada episod Boating School pada 7 Ogos 1999. Watak ini dicipta dan direka bentuk oleh ahli biologis marin dan kartunis Stephen Hillenburg.
Mrs. Puff adalah guru memandu paranoid SpongeBob dan pemilik sekolah bot bandar. Dia tidak mahu melampaui SpongeBob, kerana dia adalah pelajar yang paling berdedikasi dan rajin, tetapi dia sering panik apabila dia cuba untuk memandu bot dan gagal setiap ujian memandu yang dia ambil. Kegagalannya sering mengakibatkan kemalangan yang membawa kepada kemusnahan besar-besaran dan membahayakan Mrs. Puff. Dia cuba sedaya upaya untuk bersikap mesra dan bersabar dengan pelajarnya. Dia adalah teman wanita kepada Mr. Krabs, seorang pemilik restoran Krusty Krab. Mrs. Puff adalah ikan buntal antropomorfik.[3] Walaupun usaha dia gigih, dia tidak berjaya mengajar SpongeBob bagaimana untuk memandu bot.[4] Mrs. Puff sering memaparkan pertahanan inflasi ikan buntal kerana dia takut ketika SpongeBob menyebabkan kemalangan bot.[5]
Persahabatan Mrs. Puff terhadap watak lain sangat berbeza. Dia bersimpati dengan Squidward Tentacles, dan menganggapnya sebagai contoh utama pemandu yang sangat baik.[6]Patrick, yang telah menghadiri kelasnya berkali-kali,[7][8] dilayan dengan hormat olehnya. Mrs. Puff paling rapat dengan SpongeBob di Bikini Bottom. Walaupun dia biasanya takut untuk memandu dengan SpongeBob, dia kerap bertindak seperti seorang ibu kepada beliau.[9]
Watak ini telah menjadi terkenal dalam budaya popular kerana keperibadiannya yang tersendiri. Mrs. Puff juga telah muncul di taman tema dan iklan Toyota.
